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C18 色谱柱是高效液相色谱（HPLC）中最常用的一种色谱柱，它的分离原理基于吸附色谱和分配色谱的原理。

在吸附色谱中，固定相是一种吸附剂，它能够吸附样品中的各个组分，使得各个组分在固定相和流动相之间的分配系数不同，从而实现分离。在 C18 色谱柱中，固定相是由硅胶或其他吸附剂表面键合了十八烷基（C18）官能团的吸附剂组成的。C18 官能团具有亲水性，可以与流动相中的水分子相互作用，从而在流动相和固定相之间形成一层水膜。

当样品流经 C18 色谱柱时，样品中的各个组分会与固定相上的 C18 官能团相互作用，使得各个组分在固定相和流动相之间的分配系数不同。分配系数越大的组分，在固定相上的保留时间越长，从而在色谱图中出现的时间越晚。而分配系数小的组分则会在流动相中更快地移动，在色谱图中出现的时间越早。

此外，C18 色谱柱还可以通过改变流动相的组成和 pH 值等参数，调节样品中各个组分与固定相之间的相互作用，从而实现更好的分离效果。例如，在酸性流动相中，弱碱性化合物的保留时间会延长，从而提高它们的分离效率。

总之，C18 色谱柱的分离原理是基于吸附色谱和分配色谱的原理，通过样品中各个组分与固定相上的 C18 官能团相互作用，实现不同组分的分离。通过改变流动相的组成和 pH 值等参数，可以调节样品中各个组分的保留时间和分离效率，从而实现更好的分离效果。